TRPV4 Plasmide Double Nickase (h): sc-401432-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TRPV4 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TRPV4 Double Nickase Plasmid (h) e il TRPV4 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TRPV4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TRPV4 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401432-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TRPV4 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401432-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRPV4 codifica un canale cationico non selettivo permeabile al Ca2+ della famiglia dei recettori potenziali transitori vanilloidi, che funge da sensore polimodale di forze meccaniche, stress osmotico e temperatura. L’attivazione del canale innesca una segnalazione dipendente dal calcio che influenza il rimodellamento del citoscheletro, la regolazione del volume cellulare e programmi trascrizionali, intersecando vie come MAPK/ERK, NFAT e il rilascio di mediatori infiammatori. L’attività di TRPV4 contribuisce alle risposte di barriera epiteliale ed endoteliale, alla biologia di condrociti e osteoclasti e alla meccanotrasduzione nei tessuti sensoriali e vascolari. Alterazioni della funzione di TRPV4 sono state associate a neuropatie ereditarie e displasie scheletriche, e il gene è spesso studiato nel contesto di edema, segnalazione del dolore e rimodellamento tissutale infiammatorio.
TRPV4 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TRPV4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TRPV4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TRPV4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TRPV4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.