TNFα-IP 1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-423434

Panoramica

Tnfaip1 (TNFα-IP 1) codifica una proteina inducibile da TNFα implicata nella segnalazione responsiva allo stress e nell’omeostasi cellulare. Tra le funzioni riportate figurano ruoli in processi nucleari e citoplasmatici che influenzano la progressione del ciclo cellulare, le risposte al danno del DNA e il turnover proteico, collegando segnali infiammatori associati a TNF/NF-κB a valle con programmi trascrizionali e di sopravvivenza. Nei sistemi murini, TNFα-IP 1 viene studiata per il suo contributo alla regolazione dipendente dal contesto di proliferazione e apoptosi, processi che modellano il rimodellamento tissutale e i microambienti immunitari. La disregolazione di queste vie è spesso esaminata in modelli di biologia delle malattie infiammatorie e di segnalazione associata ai tumori, senza implicare esiti clinici.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TNFα-IP 1 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Tnfaip1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Tnfaip1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Tnfaip1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TNFα-IP 1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Tnfaip1 per lo studio della segnalazione di TNFα-IP 1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Tnfaip1 critici per la funzione di TNFα-IP 1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Tnfaip1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal TNFα-IP 1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal TNFα-IP 1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Tnfaip1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal TNFα-IP 1 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR TNFα-IP 1 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Tnfaip1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Tnfaip1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.