Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
TMEM173 Plasmide Double Nickase (m): sc-428364-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TMEM173 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TMEM173 Double Nickase Plasmid (m) e il TMEM173 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Tmem173. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: TMEM173 Antibody (C-10): sc-518172
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TMEM173 Plasmide Double Nickase (m) | sc-428364-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TMEM173 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-428364-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Tmem173 codifica TMEM173 (nota anche come STING), una proteina adattatrice residente nel reticolo endoplasmatico che coordina il riconoscimento innato del DNA citosolico. In seguito al legame con dinucleotidi ciclici prodotti da cGAS, TMEM173 attiva la segnalazione TBK1–IRF3 e l’attivazione di NF-κB, promuovendo programmi genici dell’interferone di tipo I e dell’infiammazione. Questa via si interseca con l’autofagia e le risposte allo stress cellulare e modella la difesa antivirale, le risposte ai batteri intracellulari e la segnalazione nel microambiente tumorale–immunitario nei modelli murini. Una segnalazione deregolata di TMEM173 è stata associata a infiammazione aberrante e fenotipi simil-autoimmuni, rendendola un bersaglio frequente negli studi di immunopatologia e delle interazioni ospite–patogeno.
TMEM173 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Tmem173 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Tmem173. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Tmem173. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Tmem173 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.