TMEM126A Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406768

Panoramica

TMEM126A codifica una proteina transmembrana associata ai mitocondri, implicata nella biologia della catena respiratoria e nel mantenimento della capacità di fosforilazione ossidativa. Studi collegano TMEM126A a processi correlati al complesso I mitocondriale, influenzando l’equilibrio redox cellulare, la produzione di ATP e la sensibilità allo stress metabolico. Un’alterazione della funzione di TMEM126A è stata associata a fenotipi di disfunzione mitocondriale, inclusi quadri neuro-oftalmici come l’atrofia ottica autosomica recessiva, rendendola rilevante per indagare la vulnerabilità bioenergetica nelle cellule umane. TMEM126A è quindi un bersaglio utile per studiare il controllo di qualità mitocondriale, la segnalazione adattativa allo stress e le conseguenze a valle sui programmi di sopravvivenza e differenziamento cellulare.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TMEM126A (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene TMEM126A in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del TMEM126A insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto TMEM126A a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TMEM126A.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di TMEM126A per lo studio della segnalazione di TMEM126A, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni TMEM126A critici per la funzione di TMEM126A
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di TMEM126A per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal TMEM126A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal TMEM126A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus TMEM126A. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal TMEM126A Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR TMEM126A (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia TMEM126A per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio TMEM126A definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.