TMB Substrate Buffer, 1X

Il tampone substrato TMB (3,3',5,5'-Tetrametilbenzidina), generalmente fornito come soluzione 1X pronta all'uso, è ampiamente utilizzato nei test biochimici, in particolare nei test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA). Il ruolo principale del TMB in questi test è quello di substrato cromogenico per l'enzima perossidasi di rafano (HRP), che in questi test è spesso coniugato agli anticorpi. Il meccanismo d'azione del tampone substrato TMB prevede la conversione enzimatica del TMB da parte dell'HRP in un prodotto colorato. Inizialmente, il TMB è incolore, ma in seguito all'ossidazione da parte dell'HRP in presenza di perossido di idrogeno (H₂O₂), si trasforma in una forma ossidata blu. L'intensità del colore blu prodotto è direttamente proporzionale alla quantità di enzima presente e, di conseguenza, alla quantità di antigene target nel test. Questo cambiamento colorimetrico è quantificabile mediante spettrofotometria, in genere a una lunghezza d'onda di 650 nm per la forma blu. Per una maggiore sensibilità, la reazione può essere fermata con un acido, come l'acido solforico o cloridrico, che sposta il colore blu verso il giallo, misurabile a 450 nm. Questo spostamento non solo amplifica il segnale ma lo stabilizza, consentendo letture più accurate. Nella ricerca, il tampone substrato TMB è apprezzato per la sua elevata sensibilità e specificità. Consente di rilevare e quantificare varie molecole biologiche, tra cui ormoni, proteine e anticorpi, rendendolo indispensabile nella ricerca diagnostica, nell'analisi quantitativa e qualitativa dei biomarcatori e in varie altre applicazioni in cui è richiesta una misurazione precisa delle interazioni biologiche. La formulazione pronta all'uso del TMB Substrate Buffer 1X semplifica l'impostazione del test, garantendo coerenza e affidabilità tra gli esperimenti.