TLR6 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-423420

Panoramica

Tlr6 codifica il recettore Toll-like 6 (TLR6), un recettore di riconoscimento di pattern che forma eterodimeri funzionali con TLR2 per rilevare i lipopeptidi microbici sulla superficie cellulare e avviare la segnalazione dell’immunità innata. In seguito al legame con il ligando, TLR6 recluta proteine adattatrici come MYD88 per attivare la cascata di segnalazione IRAK–TRAF6, promuovendo l’attivazione delle vie NF-κB e MAPK e l’induzione di citochine e chemochine infiammatorie. Nei compartimenti mieloidi ed epiteliali del topo, TLR6 contribuisce a plasmare le risposte antimicrobiche e a modulare il dialogo tra immunità innata e adattativa. Un’alterata regolazione della segnalazione dipendente da TLR6 è stata implicata nella patobiologia infiammatoria, incluse risposte modificate in modelli di infezione, infiammazione delle vie aeree e infiammazione metabolica.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TLR6 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Tlr6 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Tlr6 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Tlr6 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TLR6.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Tlr6 per lo studio della segnalazione di TLR6, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Tlr6 critici per la funzione di TLR6
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Tlr6 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal TLR6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal TLR6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Tlr6. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal TLR6 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR TLR6 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Tlr6 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Tlr6 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.