TLR3 Plasmide Double Nickase (m): sc-431258-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TLR3 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TLR3 Double Nickase Plasmid (m) e il TLR3 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Tlr3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TLR3 Plasmide Double Nickase (m) | sc-431258-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TLR3 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-431258-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Tlr3 codifica il recettore Toll-like 3 (TLR3), un recettore endosomiale di riconoscimento di pattern che rileva l’RNA a doppio filamento prodotto durante la replicazione virale o rilasciato da cellule danneggiate. In seguito al legame con il ligando, TLR3 segnala principalmente attraverso l’adattatore TRIF per attivare le vie di IRF3/IRF7 e NF-κB, promuovendo la produzione di interferoni di tipo I e programmi di citochine infiammatorie. Questo recettore contribuisce al sensing immunitario innato, alla maturazione delle cellule dendritiche e alla regolazione delle risposte antivirali, intersecandosi anche con vie che controllano l’apoptosi e l’autofagia. Un’attività alterata di TLR3 è stata collegata a variazioni della suscettibilità alle infezioni virali e a un’infiammazione deregolata, rilevante per fenotipi neuroinfiammatori e simil-autoimmuni in modelli murini.
TLR3 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Tlr3 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Tlr3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Tlr3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Tlr3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.