Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
TLR2 Plasmide Double Nickase (h): sc-400267-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TLR2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TLR2 Double Nickase Plasmid (h) e il TLR2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TLR2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: TLR2 Antibody (TL2.1): sc-21759
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TLR2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400267-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TLR2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400267-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TLR2 codifica il recettore Toll-like 2, un recettore di riconoscimento di pattern localizzato sulla membrana plasmatica che rileva lipoproteine batteriche e altri ligandi microbici, spesso tramite eterodimerizzazione con TLR1 o TLR6. Una volta attivato, TLR2 trasduce il segnale attraverso vie dipendenti da MYD88 e TIRAP per indurre le cascate di NF-κB e MAPK, promuovendo la trascrizione di citochine e chemochine pro-infiammatorie e modulando il dialogo tra immunità innata e adattativa. L’attività di TLR2 si interfaccia anche con programmi legati a fagocitosi, autofagia e inflammasoma, influenzando le risposte antimicrobiche e l’omeostasi tissutale. Una segnalazione di TLR2 deregolata è stata implicata in stati infiammatori cronici e nella patologia associata alle infezioni, rendendolo un nodo ampiamente studiato nella ricerca sulle interazioni ospite–microbo e sull’infiammazione sterile.
TLR2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TLR2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TLR2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TLR2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TLR2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.