TGIF Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-401472-LAC
- alvos específicos: human
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- TGIF as Partículas de Ativação Lentiviral (h) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- TGIF As partículas de ativação lentivirais (h) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo TGIF Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h) e pelo TGIF Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor TGIF1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: TGIF Anticorpo (H-1): sc-17800
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TGIF Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h) | sc-401472-LAC | 200 µl | $455.00 |
O TGIF1 humano codifica o TGIF, um correpressor transcricional com homeobox do tipo TALE que modula programas de expressão génica durante o desenvolvimento e a homeostase dos tecidos. O TGIF integra-se na sinalização TGF-β/SMAD ao ligar-se a complexos SMAD2/3 e ao recrutar a maquinaria de correpressão para ajustar as respostas transcricionais, influenciando assim decisões de destino celular, a transição epitélio–mesênquima e a diferenciação. Também interage com redes transcricionais dependentes do ácido retinóico e com processos mais amplos de regulação da cromatina que moldam a morfogénese. A atividade ou expressão desregulada de TGIF1 tem sido associada a fenótipos congénitos do desenvolvimento e tem sido estudada no contexto da reprogramação transcricional oncogénica e de alterações na saída da via TGF-β.
As Partículas de Ativação Lentivirais TGIF (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de TGIF1 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais TGIF (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição TGIF1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de TGIF. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo TGIF1 e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.