TGFβ2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400496

개요

TGFB2는 형질전환 성장인자 베타 2(TGFβ2)를 암호화하며, TGFβ2는 분비형 사이토카인으로서 TGF-β 수용체의 세린/트레오닌 키나아제를 통해 신호를 전달해 SMAD2/3 의존적 전사를 활성화하고, MAPK, PI3K/AKT, Rho 계열 GTPase와 같은 비정형(non-canonical) 경로와도 교차합니다. TGFβ2는 세포외기질(ECM) 리모델링, 상피-간엽 전이(EMT), 면역 조절, 그리고 발생 및 조직 항상성 동안의 세포 운명 결정에 중요한 조절자입니다. TGFB2 신호의 이상 조절은 섬유화, 비정상적인 상처 치유, 종양–기질 상호작용과 연관되어 있어 미세환경에 의해 유도되는 표현형 연구에 유의미합니다. 인간 세포 모델에서 TGFB2를 교란하면 TGF-β 경로의 동역학과 하위 유전자 조절 프로그램에 대한 기전적 분석을 수행하는 데 도움이 됩니다.

TGFβ2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TGFB2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TGFB2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TGFB2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TGFβ2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TGFβ2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TGFB2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TGFβ2 기능에 중요한 TGFB2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TGFB2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TGFβ2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 TGFβ2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TGFB2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TGFβ2 HDR 플라스미드 (h) 및 TGFβ2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TGFB2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TGFB2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.