Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TEF-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2): sc-423329-KO-2
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TEF-3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TEF-3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TEF-3 Anticorpo (N-G2): sc-101184
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TEF-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) | sc-423329-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Tead4 codifica o fator de transcrição TEF-3, uma proteína de ligação ao DNA com domínio TEA/ATTS que atua em parceria com coativadores como YAP/TAZ para regular programas gênicos que controlam proliferação, sobrevivência e decisões de destino celular. No desenvolvimento de camundongos, o TEAD4 é um determinante-chave da especificação do trofectoderma e contribui para a organização epitelial e o comprometimento de linhagem por meio de transcrição responsiva à via Hippo. A atividade do TEF-3 integra sinais mecânicos e a sinalização de quinases a montante para modular genes-alvo envolvidos no controle do crescimento e na diferenciação. A desregulação da sinalização da família TEAD tem sido associada a alterações na homeostase tecidual e a programas transcricionais oncogênicos, tornando o Tead4 um nó útil para estudar a regulação transcricional dependente do contexto.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TEF-3 (m2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tead4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tead4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tead4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TEF-3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tead4 para a investigação da sinalização de TEF-3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tead4 críticos para a função TEF-3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tead4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TEF-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TEF-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tead4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TEF-3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TEF-3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tead4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tead4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.