TBX2 Plasmide Double Nickase (h): sc-403078-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TBX2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TBX2 Double Nickase Plasmid (h) e il TBX2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TBX2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: TBX2 Antibody (D-3): sc-514291
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TBX2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403078-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TBX2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403078-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TBX2 codifica un fattore di trascrizione della famiglia T-box che regola i programmi di espressione genica dello sviluppo e coordina le decisioni di destino cellulare legandosi a specifici motivi del DNA e modulando la trascrizione dipendente dalla cromatina. Nelle cellule umane, TBX2 influenza la progressione del ciclo cellulare e le vie associate alla senescenza attraverso la repressione di reti oncosoppressorie, tra cui CDKN2A/p14ARF e CDKN1A/p21, con effetti a valle su proliferazione e differenziamento. Un’attività di TBX2 deregolata è stata collegata ad alterazioni della specificazione di linea e a un controllo anomalo della crescita, rendendolo un nodo utile per studiare i circuiti trascrizionali nello sviluppo e nella biologia dei tumori. La regolazione genica dipendente da TBX2 viene inoltre studiata nel contesto delle dinamiche epitelio-mesenchimali e del crosstalk tra vie di segnalazione legate all’organogenesi.
TBX2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TBX2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TBX2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TBX2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TBX2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.