TALK-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406360
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TALK-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TALK-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TALK-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406360 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
KCNK16 codifica o TALK-1 (K2P16.1), um canal de potássio de dois poros (K2P) que contribui para a condutância basal de K⁺ e estabelece o potencial de membrana em repouso em células excitáveis e secretoras. Ao regular a excitabilidade da membrana, o TALK-1 influencia a entrada de Ca²⁺ dependente de voltagem e vias de sinalização a jusante acopladas ao Ca²⁺, que moldam o acoplamento estímulo–secreção e as respostas celulares ao stresse. O canal é enriquecido nas ilhotas pancreáticas, onde alterações no fluxo de K⁺ podem modular a atividade elétrica das células β e a dinâmica da libertação de insulina. Estudos genéticos e funcionais associaram a atividade de KCNK16/TALK-1 a características metabólicas, tornando-o relevante para investigação mecanística em sinalização associada à diabetes e fisiologia de canais iónicos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TALK-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KCNK16 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KCNK16, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KCNK16 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TALK-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KCNK16 para a investigação da sinalização de TALK-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KCNK16 críticos para a função TALK-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KCNK16 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TALK-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TALK-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KCNK16. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TALK-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TALK-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KCNK16 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KCNK16 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.