TAF5L Plasmide Double Nickase (h): sc-408861-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TAF5L Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TAF5L Double Nickase Plasmid (h) e il TAF5L Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TAF5L. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TAF5L Plasmide Double Nickase (h) | sc-408861-NIC | 20 µg | $410.00 |
TAF5L codifica una proteina simile ai fattori associati a TBP (TBP-associated factor–like) che partecipa all’inizio della trascrizione contribuendo all’assemblaggio e alla stabilità dei complessi di pre-inizio della RNA polimerasi II. Come componente associata alla regolazione trascrizionale correlata a TFIID/SAGA, TAF5L aiuta a coordinare il riconoscimento del promotore, il controllo dell’espressione genica dipendente dalla cromatina e programmi trascrizionali legati all’identità cellulare e alla proliferazione. Alterazioni della funzione di TAF5L possono compromettere l’omeostasi trascrizionale globale e sono state studiate nel contesto della deregolazione trascrizionale osservata nel cancro e in altre malattie in cui l’architettura dei promotori e l’equilibrio dei coattivatori risultano modificati. Queste caratteristiche rendono TAF5L un bersaglio utile per studi meccanicistici sulle reti dei fattori trascrizionali di base e sulla regolazione genica accoppiata alla cromatina.
TAF5L Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TAF5L nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TAF5L. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TAF5L. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TAF5L interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.