Plásmido Doble Nickase (h) TADA2B: sc-406224-NIC

TADA2B codifica un componente adaptador transcripcional de los complejos coactivadores SAGA/ATAC con actividad acetiltransferasa de histonas, conectando factores de transcripción específicos de secuencia con la maquinaria que modifica la cromatina. A través de interacciones con GCN5/PCAF y subunidades relacionadas, TADA2B contribuye a la acetilación de histonas, a la accesibilidad de los promotores y a la regulación coordinada de programas de expresión génica implicados en el control del ciclo celular, la diferenciación y las respuestas al estrés celular. La alteración de la integridad del complejo SAGA/ATAC puede desestabilizar la regulación epigenética y la homeostasis transcripcional, procesos que con frecuencia se asocian con la transformación oncogénica y otros trastornos de la regulación génica. Como regulador asociado a la cromatina, TADA2B es relevante para estudiar los mecanismos que acoplan la acetilación de histonas al inicio de la transcripción y a la comunicación entre potenciadores (enhancers) y promotores en células humanas.

TADA2B El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TADA2B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TADA2B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TADA2B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TADA2B alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.