Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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T6BP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404858
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- T6BP El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico T6BP, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: T6BP Anticuerpo (H-6): sc-393143
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
T6BP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404858 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
TAX1BP1 codifica T6BP, una proteína adaptadora que coordina la señalización dependiente de ubiquitina en la intersección de la inmunidad innata, el control de la inflamación y la autofagia selectiva. T6BP se une a cadenas de ubiquitina y a socios como A20/TNFAIP3 y proteínas TRAF para modular la señalización de NF-κB aguas abajo de receptores como TNFR y los receptores tipo Toll, ayudando a ajustar las respuestas de citocinas y antivirales. También participa en el manejo autofágico de carga ubiquitinada y en vías de control de calidad que influyen en la tolerancia al estrés celular y la supervivencia. La desregulación de la señalización y la proteostasis asociadas a TAX1BP1 se ha vinculado con fenotipos inflamatorios y vías relevantes para el cáncer, lo que lo convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos de la regulación inmunitaria y la señalización por ubiquitina.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO T6BP (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TAX1BP1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TAX1BP1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TAX1BP1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína T6BP.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TAX1BP1 para la investigación de la señalización de T6BP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de TAX1BP1 críticos para la función de T6BP
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TAX1BP1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido T6BP CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido T6BP CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TAX1BP1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR T6BP (h) y el plásmido HDR T6BP (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TAX1BP1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TAX1BP1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.