Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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T6BP Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-404858
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- T6BP Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico T6BP, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: T6BP Antibody (H-6): sc-393143
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
T6BP Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-404858 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
TAX1BP1 codifica T6BP, una proteina adattatrice che coordina la segnalazione dipendente dall’ubiquitina all’intersezione tra immunità innata, controllo dell’infiammazione e autofagia selettiva. T6BP si lega a catene di ubiquitina e interagisce con partner quali A20/TNFAIP3 e le proteine TRAF per modulare la segnalazione di NF-κB a valle di recettori tra cui TNFR e i recettori Toll-like, contribuendo a calibrare le risposte citochiniche e antivirali. Partecipa inoltre alla gestione autofagica di carichi ubiquitinati e a vie di controllo qualità che influenzano la tolleranza allo stress cellulare e la sopravvivenza. La disregolazione della segnalazione e della proteostasi collegate a TAX1BP1 è stata associata a fenotipi infiammatori e a vie rilevanti per il cancro, rendendolo un nodo utile per studi meccanicistici sulla regolazione immunitaria e sulla segnalazione dell’ubiquitina.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO T6BP (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene TAX1BP1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del TAX1BP1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto TAX1BP1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina T6BP.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di TAX1BP1 per lo studio della segnalazione di T6BP, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni TAX1BP1 critici per la funzione di T6BP
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di TAX1BP1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal T6BP CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal T6BP CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus TAX1BP1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal T6BP Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR T6BP (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia TAX1BP1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio TAX1BP1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.