Plasmide Double Nickase (h) Tβ-4 Y-linked: sc-418116-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Tβ-4 Y-linked correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Tβ-4 Y-linked Double Nickase (h) et le plasmide Tβ-4 Y-linked Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TMSB4Y. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Tβ-4 Y-linked | sc-418116-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Tβ-4 Y-linked | sc-418116-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TMSB4Y code la thymosine bêta-4 liée au chromosome Y, un petit peptide séquestrant l’actine qui régule la disponibilité de la G‑actine et influence le remodelage du cytosquelette, les changements de forme cellulaire et la motilité. En modulant la dynamique de l’actine, la Tβ‑4 liée au chromosome Y peut affecter des processus associés à la migration cellulaire, à l’adhésion et aux réponses au stress, en interagissant avec des voies dépendant d’un renouvellement rapide de l’actine. En tant que paralogue lié au chromosome Y au sein de la famille des thymosines bêta, elle est pertinente pour l’étude de la régulation génique biaisée selon le sexe et de la biologie spécifique au sexe masculin, notamment dans des contextes où des altérations du comportement du cytosquelette contribuent à des phénotypes associés à des maladies.
Tβ-4 Y-linked Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TMSB4Y dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TMSB4Y. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TMSB4Y. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TMSB4Y.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.