Tβ-4 Y-linked Plasmide Double Nickase (h): sc-418116-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Tβ-4 Y-linked Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Tβ-4 Y-linked Double Nickase Plasmid (h) e il Tβ-4 Y-linked Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TMSB4Y. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Tβ-4 Y-linked Plasmide Double Nickase (h) | sc-418116-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Tβ-4 Y-linked Plasmide Double Nickase (h2) | sc-418116-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TMSB4Y codifica la timosina beta-4 legata al cromosoma Y, un piccolo peptide che sequestra l’actina e regola la disponibilità di G-actina, influenzando il rimodellamento del citoscheletro, i cambiamenti di forma cellulare e la motilità. Attraverso la modulazione della dinamica dell’actina, la Tβ-4 legata al cromosoma Y può incidere su processi connessi a migrazione cellulare, adesione e risposte allo stress, intersecando vie che dipendono da un rapido turnover dell’actina. In quanto paralogo legato al cromosoma Y all’interno della famiglia della timosina beta, è rilevante per studi sulla regolazione genica con bias sessuale e sulla biologia maschile specifica, inclusi contesti in cui alterazioni del comportamento citoscheletrico contribuiscono a fenotipi associati a malattia.
Tβ-4 Y-linked Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TMSB4Y nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TMSB4Y. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TMSB4Y. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TMSB4Y interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.