Tβ-10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407294

Visão geral

TMSB10 codifica a timosina beta-10 (Tβ-10), uma pequena proteína sequestradora de actina que regula a disponibilidade de actina G e, assim, influencia a dinâmica dos filamentos de actina, a forma celular e a motilidade. Ao modular a remodelação do citoesqueleto, a Tβ-10 afeta processos como a progressão do ciclo celular, a adesão e as respostas ao stress, com efeitos a jusante em redes de sinalização ligadas à migração e à sobrevivência. Alterações na expressão de TMSB10 têm sido relatadas em múltiplos contextos de doença, incluindo a biologia do cancro e estados inflamatórios, nos quais mudanças na organização da actina podem contribuir para a invasão, fenótipos relacionados com a angiogénese e a remodelação tecidular. Por isso, o TMSB10 é frequentemente estudado em vias que ligam a regulação do citoesqueleto a programas transcricionais e transições de estado celular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Tβ-10 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TMSB10 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TMSB10, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TMSB10 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Tβ-10.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TMSB10 para a investigação da sinalização de Tβ-10, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TMSB10 críticos para a função Tβ-10
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TMSB10 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Tβ-10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Tβ-10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TMSB10. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Tβ-10 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Tβ-10 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TMSB10 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TMSB10 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.