Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
SRp30c Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-403790
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SRp30c Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico SRp30c, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SRp30c Antibody (1G7): sc-293314
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SRp30c Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-403790 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
SRSF9 codifica il fattore di splicing ricco in serina/arginina SRp30c, una proteina legante l’RNA che contribuisce alla selezione dei siti di splicing e alla definizione degli esoni durante la maturazione del pre-mRNA. Attraverso interazioni con gli enhancer esonici dello splicing e con altre proteine SR, SRp30c aiuta a coordinare programmi di splicing alternativo che determinano la produzione di isoforme trascrittomiche, collegando l’elaborazione dell’RNA alla trascrizione e al destino dell’mRNA a valle. Queste decisioni di splicing possono influenzare il controllo del ciclo cellulare, le risposte allo stress e le reti di espressione genica associate alla differenziazione. L’attività deregolata delle proteine SR e i pattern di splicing alterati sono ampiamente implicati nella biologia dei tumori e delle malattie neurodegenerative, rendendo SRSF9 un nodo rilevante per studi meccanicistici di fenotipi guidati dallo splicing.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SRp30c (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SRSF9 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SRSF9 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SRSF9 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SRp30c.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SRSF9 per lo studio della segnalazione di SRp30c, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni SRSF9 critici per la funzione di SRp30c
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SRSF9 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal SRp30c CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal SRp30c CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SRSF9. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal SRp30c Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR SRp30c (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SRSF9 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SRSF9 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.