Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Src Plasmide Double Nickase (m): sc-423151-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Src Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Src Double Nickase Plasmid (m) e il Src Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Src. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Src Antibody (H-12): sc-5266
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Src Plasmide Double Nickase (m) | sc-423151-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Src Plasmide Double Nickase (m2) | sc-423151-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mouse Src codifica la tirosina chinasi non recettoriale Src, un regolatore centrale della segnalazione a valle delle integrine, delle tirosina chinasi recettoriali e dei recettori immunitari. L’attività di Src coordina cascate di fosforilazione che controllano il rimodellamento del citoscheletro, la dinamica delle adesioni focali, la progressione del ciclo cellulare e vie di sopravvivenza che includono PI3K–AKT e MAPK/ERK. Attraverso queste reti, Src influenza la migrazione cellulare, programmi associati all’invasione e processi legati alla transizione epitelio–mesenchimale in modelli sperimentali. Una segnalazione di Src deregolata è frequentemente implicata nella trasformazione oncogenica e in fenotipi metastatici, rendendolo un nodo ampiamente utilizzato per analizzare la segnalazione chinasica aberrante in contesti rilevanti per la malattia.
Src Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Src nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Src. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Src. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Src interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.