SPNS2 Plasmide Double Nickase (h): sc-405481-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SPNS2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SPNS2 Double Nickase Plasmid (h) e il SPNS2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SPNS2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SPNS2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405481-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SPNS2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405481-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SPNS2 (spinster omologo 2) codifica un trasportatore di membrana multipasso che media l’esportazione della sfingosina-1-fosfato (S1P), modellando gradienti extracellulari di S1P che regolano la migrazione cellulare, l’integrità vascolare e il traffico delle cellule immunitarie. Controllando la disponibilità di S1P per la segnalazione mediata dai recettori S1PR, SPNS2 si colloca all’interfaccia tra il metabolismo degli sfingolipidi e le vie a valle che influenzano la funzione della barriera endoteliale e l’egresso dei linfociti. Un’alterata attività di SPNS2 è stata associata a risposte infiammatorie deregolate e a fenotipi vascolari, e il suo ruolo nella segnalazione mediata dai lipidi la rende rilevante per studi sulle dinamiche del microambiente tumorale e sull’omeostasi dei tessuti. Queste caratteristiche rendono SPNS2 un bersaglio utile per indagini meccanicistiche sul trasporto lipidico, la segnalazione mediata da recettori e la comunicazione cellula–cellula.
SPNS2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SPNS2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SPNS2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SPNS2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SPNS2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.