Sp110 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405542

Panoramica

SP110 codifica Sp110, una proteina associata ai corpi nucleari coinvolta nella regolazione trascrizionale e nel controllo dei programmi immunitari dipendenti dalla cromatina. Sp110 partecipa all’architettura nucleare e interagisce con complessi regolatori che modellano l’espressione genica responsiva all’interferone e quella infiammatoria, collegandola alle vie di difesa dell’ospite e a funzioni associate ai macrofagi. Studi genetici ed espressivi hanno messo in relazione SP110 con la suscettibilità e la variabilità di fenotipi immuno-mediati, supportandone l’uso come punto di accesso molecolare per analizzare le reti di segnalazione dell’immunità innata. Un’attività alterata di SP110 viene inoltre sfruttata per studiare come i componenti dei corpi nucleari influenzino lo stato cellulare, gli output trascrizionali e i circuiti genici di risposta ai patogeni.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Sp110 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SP110 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SP110 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SP110 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Sp110.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SP110 per lo studio della segnalazione di Sp110, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni SP110 critici per la funzione di Sp110
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SP110 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Sp110 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Sp110 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SP110. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Sp110 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Sp110 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SP110 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SP110 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.