Sox-7 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-402935

Panoramica

SOX7 codifica il fattore di trascrizione umano Sox-7, un membro della famiglia SOX che si lega al DNA tramite un dominio HMG box per regolare programmi di espressione genica che controllano le decisioni di destino cellulare. Sox-7 è implicato nello sviluppo vascolare e dell’endoderma e influenza la differenziazione endoteliale, la migrazione e reti trascrizionali legate alla funzione di barriera, includendo interazioni (crosstalk) con la segnalazione Wnt/β-catenina e con vie associate a Notch. Un’espressione alterata di SOX7 è stata riportata in molteplici contesti tumorali ed è associata a cambiamenti nella proliferazione, nell’invasione e in vie correlate alla transizione epitelio-mesenchimale. Poiché Sox-7 integra segnali di sviluppo e di specificazione di linea, è spesso studiato in modelli di angiogenesi, differenziazione delle cellule staminali e biologia del cancro.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Sox-7 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SOX7 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SOX7 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SOX7 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Sox-7.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SOX7 per lo studio della segnalazione di Sox-7, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni SOX7 critici per la funzione di Sox-7
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SOX7 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Sox-7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Sox-7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SOX7. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Sox-7 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Sox-7 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SOX7 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SOX7 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.