Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Sox-13 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-409568
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Sox-13 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico Sox-13, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Sox-13 Antibody (B-5): sc-515107
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Sox-13 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-409568 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
SOX13 codifica Sox-13, un fattore di trascrizione con dominio HMG-box (high-mobility group) della famiglia SOX, che si lega al DNA per modulare programmi di espressione genica specifici di linea cellulare. Sox-13 partecipa a processi di sviluppo e differenziamento, inclusa la regolazione di reti trascrizionali che orientano le decisioni sul destino cellulare e l’espressione di geni legati al sistema immunitario. Nelle cellule umane, l’attività di SOX13 è collegata a vie che governano il controllo trascrizionale e la regolazione dipendente dalla cromatina, con associazioni riportate, in contesti specifici, a disregolazioni immunitarie e a stati trascrizionali correlati al cancro. Analizzare la funzione di SOX13 aiuta a chiarire come i fattori della famiglia SOX coordinino circuiti regolatori genici che influenzano proliferazione, differenziamento e trascrizione in risposta allo stress.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Sox-13 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SOX13 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SOX13 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SOX13 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Sox-13.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SOX13 per lo studio della segnalazione di Sox-13, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni SOX13 critici per la funzione di Sox-13
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SOX13 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal Sox-13 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Sox-13 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SOX13. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal Sox-13 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Sox-13 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SOX13 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SOX13 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.