Somatostatin Particelle di Attivazione Lentivirale (h): sc-400280-LAC

Il gene umano **SST** codifica la somatostatina, un ormone peptidico neuroendocrino che sopprime in modo ampio la secrezione dell’ormone della crescita, dell’insulina, del glucagone e di numerosi peptidi gastrointestinali attraverso la segnalazione dei recettori GPCR **SSTR1–SSTR5**. La segnalazione della somatostatina modula le vie dipendenti da **cAMP/PKA**, **MAPK** e dal **calcio**, plasmando l’eccitabilità neuronale, i circuiti di feedback endocrini e la motilità gastrointestinale, nonché la gestione dei nutrienti. Nelle isole pancreatiche, la somatostatina derivata dalle cellule **δ** regola la comunicazione paracrina e la pulsatilità ormonale, mentre nel SNC influenza la trasmissione sinaptica e le oscillazioni di rete. Un’alterata espressione di **SST** o un’alterazione del tono somatostatinergico è implicata in disturbi che coinvolgono la disregolazione endocrina e la neurobiologia, inclusi la disfunzione delle isole correlata al diabete e fenotipi neurodegenerativi o neuropsichiatrici caratterizzati da cambiamenti degli interneuroni.

Le particelle di attivazione lentivirale Somatostatin (h) rispondono a questa esigenza incapsulando il sistema completo di attivazione trascrizionale del mediatore di attivazione sinergica (SAM) in particelle lentivirali ad alto titolo pronte per la trasduzione, consentendo un'efficiente sovraregolazione di SST in una gamma più ampia di tipi di cellule umane.

Le particelle di attivazione lentivirale Somatostatin (h) veicolano tutti i componenti funzionali del sistema del mediatore di attivazione sinergica (SAM) tramite trasduzione lentivirale. Il sistema comprende tre preparati di particelle co-trasdotti nelle cellule bersaglio: uno che codifica per dCas9 cataliticamente inattivo (mutazioni D10A e N863A) fuso al dominio di transattivazione VP64 con un gene di resistenza alla blasticidina; una che codifica la proteina di fusione MS2-p65-HSF1 con un gene di resistenza all'igromicina; e una che codifica un sgRNA di 20 nt specifico per il bersaglio fuso a due aptameri di RNA MS2 con un gene di resistenza alla puromicina. A seguito della trasduzione lentivirale e dell'integrazione genomica dei cassetti di espressione, i componenti del SAM vengono espressi in modo stabile e si assemblano nel locus bersaglio all'interno della regione promotrice prossimale a monte del sito di inizio della trascrizione SST, dove VP64, p65 e HSF1 agiscono in modo cooperativo per reclutare il machinery trascrizionale endogeno e guidare una sovraregolazione sostenuta dell'espressione endogena di Somatostatin. L'uso di dCas9 inattivo nei confronti delle nucleasi evita l'introduzione di rotture del DNA a doppio filamento e preserva il locus genomico nativo SST e l'architettura regolatoria.

Il formato lentivirale offre diversi vantaggi pratici: l'integrazione genomica stabile supporta l'attivazione ereditaria attraverso le divisioni cellulari; le preparazioni di particelle ad alto titolo eliminano la necessità di una produzione virale interna; e la compatibilità con tipi di cellule primarie, non in divisione e resistenti alla trasfezione amplia l'accessibilità sperimentale. Il successo della trasduzione può essere confermato e potenziato attraverso una selezione antibiotica tripla utilizzando puromicina, igromicina e blasticidina.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.