SNX10 Plasmide Double Nickase (h): sc-416307-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SNX10 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SNX10 Double Nickase Plasmid (h) e il SNX10 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SNX10. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SNX10 Antibody (1G5): sc-293380
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SNX10 Plasmide Double Nickase (h) | sc-416307-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SNX10 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-416307-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SNX10 (sorting nexin 10) è una sorting nexin con dominio PX che lega i fosfoinositidi e contribuisce a coordinare il traffico di membrana endosomiale, lo smistamento del carico e la dinamica degli organelli. Accoppiando il riconoscimento lipidico ai macchinari di trasporto vescicolare, SNX10 contribuisce alla maturazione degli endosomi, al turnover dei recettori e all’omeostasi della segnalazione intracellulare. L’attività di SNX10 è stata inoltre collegata alla funzione degli osteoclasti e ai processi di acidificazione vescicolare che influenzano il rimodellamento osseo e le vie degradative cellulari. La disregolazione dei programmi di traffico associati a SNX10 è rilevante negli studi di biologia scheletrica e nelle patologie che coinvolgono alterazioni del trasporto endolisosomiale.
SNX10 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SNX10 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SNX10. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SNX10. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SNX10 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.