SNM1A Plasmide Double Nickase (h): sc-411393-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SNM1A Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SNM1A Double Nickase Plasmid (h) e il SNM1A Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira DCLRE1A. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SNM1A Plasmide Double Nickase (h) | sc-411393-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SNM1A Plasmide Double Nickase (h2) | sc-411393-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DCLRE1A codifica SNM1A, un’esonucleasi 5′–3′ della famiglia delle metallo-β-lattamasi che favorisce la riparazione dei crosslink interfilamento del DNA e di altre lesioni che bloccano le forcelle di replicazione. SNM1A agisce a valle della via dell’anemia di Fanconi e coopera con endonucleasi specifiche per la struttura per processare intermedi di DNA derivati dai crosslink, sostenendo la riparazione accoppiata alla replicazione e la stabilità del genoma. Limitando lo stress replicativo e le aberrazioni cromosomiche, SNM1A contribuisce alle risposte cellulari al danno genotossico e al mantenimento della capacità proliferativa. Alterazioni dell’attività di DCLRE1A/SNM1A sono state associate a una ridotta tolleranza al danno del DNA e a una maggiore suscettibilità a fenotipi di instabilità genomica rilevanti per la biologia del cancro e per disordini ereditari della riparazione del DNA.
SNM1A Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus DCLRE1A nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di DCLRE1A. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di DCLRE1A. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con DCLRE1A interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.