SNAT1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-430613
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SNAT1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SNAT1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SNAT1 Anticuerpo (H-9): sc-137032
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SNAT1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-430613 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Slc38a1 codifica el transportador 1 de aminoácidos neutros acoplado a sodio (SNAT1), un transportador del sistema A que media la captación dependiente de Na⁺ de pequeños aminoácidos neutros como la glutamina, la alanina y la serina a través de la membrana plasmática. Al regular la disponibilidad intracelular de aminoácidos, SNAT1 contribuye al balance de nitrógeno celular, a la homeostasis redox y a programas de señalización metabólica, incluida la regulación de mTORC1 sensible a aminoácidos. En tejidos de ratón, la actividad de SNAT1 es especialmente relevante para el manejo de aminoácidos en neuronas y células gliales, que sostiene el ciclo de neurotransmisores y las demandas bioenergéticas. Las alteraciones en el transporte de aminoácidos neutros se han vinculado a respuestas al estrés metabólico y a fenotipos asociados a la neurobiología, lo que convierte a Slc38a1 en una diana útil para estudiar el transporte de nutrientes y la interconexión de vías de señalización.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SNAT1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Slc38a1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Slc38a1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Slc38a1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SNAT1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Slc38a1 para la investigación de la señalización de SNAT1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Slc38a1 críticos para la función de SNAT1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Slc38a1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SNAT1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SNAT1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Slc38a1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SNAT1 (m) y el plásmido HDR SNAT1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Slc38a1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Slc38a1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.