Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SMYD2 Plasmide Double Nickase (h): sc-403129-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SMYD2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SMYD2 Double Nickase Plasmid (h) e il SMYD2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SMYD2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SMYD2 Antibody (F-9): sc-393827
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SMYD2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403129-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SMYD2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403129-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SMYD2 (proteina 2 contenente i domini SET e MYND) è una metiltransferasi della lisina che modifica substrati istonici e non istonici per regolare lo stato della cromatina, i programmi trascrizionali e la progressione del ciclo cellulare. Attraverso il controllo dell’espressione genica e dell’attività proteica dipendente dalla metilazione, SMYD2 influenza le risposte al danno al DNA, la segnalazione dello stress e le vie associate alla differenziazione. Un’attività alterata di SMYD2 è stata collegata alla proliferazione disregolata e al rimodellamento epigenetico osservati in molteplici contesti tumorali, rendendola un nodo spesso studiato nelle reti di segnalazione oncogeniche. In quanto enzima associato alla cromatina, SMYD2 è anche rilevante per studiare come le modifiche post-traduzionali coordinino la trascrizione con la replicazione e la riparazione.
SMYD2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SMYD2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SMYD2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SMYD2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SMYD2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.