SmcY CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h2): sc-403217-KO-2

개요

KDM5D는 Y 염색체에 연결된 리신 탈메틸화효소인 SmcY를 암호화하며, SmcY는 H3K4me3/me2 표지를 제거해 전사 프로그램과 염색질 접근성을 조절하는 JmjC 도메인 효소입니다. 프로모터 연관 히스톤 메틸화를 재구성함으로써 SmcY는 세포 상태 전환, 계통(라인리지) 제한적 유전자 발현의 후성유전적 제어, 그리고 복제와 수선 같은 DNA 주형 기반 과정의 조정에 기여합니다. KDM5 계열 활성의 변이 또는 조절 이상은 분화 및 증식 표현형 변화와 연관되어 왔으며, KDM5D는 남성 특이적 유전자 조절과 Y 염색체 연관 질병 생물학에서의 기여 맥락에서 자주 연구됩니다. 후성유전 조절인자로서 SmcY는 히스톤 메틸화 동역학이 인간 세포에서의 신호전달 출력과 유전체 조절에 어떤 영향을 미치는지 규명하는 데 유용한 진입점을 제공합니다.

SmcY CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)는 human 세포주에서 KDM5D 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 KDM5D 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 KDM5D의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 SmcY 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 SmcY 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 KDM5D 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• SmcY 기능에 중요한 KDM5D 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 KDM5D 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• SmcY CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 SmcY CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 KDM5D 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  SmcY HDR 플라스미드 (h) 및 SmcY HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 KDM5D 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 KDM5D 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.