Smarcad1 Plasmide Double Nickase (m): sc-420234-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Smarcad1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Smarcad1 Double Nickase Plasmid (m) e il Smarcad1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Smarcad1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Smarcad1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-420234-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Smarcad1 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-420234-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino Smarcad1 codifica un fattore di rimodellamento della cromatina ATP-dipendente della famiglia SNF2 che contribuisce a regolare la dinamica dei nucleosomi durante la replicazione e la riparazione del DNA. SMARCAD1 partecipa al riassemblaggio della cromatina alle forcelle di replicazione, promuove la resezione delle estremità nelle rotture a doppio filamento e sostiene la ricombinazione omologa, limitando al contempo eventi di ricombinazione aberrante. Attraverso interazioni con complessi associati alla replicazione e alla riparazione, influenza la regolazione trascrizionale, il mantenimento dell’eterocromatina e la stabilità del genoma. Un’alterata funzione di SMARCAD1 è stata collegata a difetti nelle risposte al danno al DNA e nella regolazione epigenetica, rendendolo rilevante per studi sull’instabilità genomica, fenotipi dello sviluppo e disregolazione della cromatina associata al cancro.
Smarcad1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Smarcad1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Smarcad1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Smarcad1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Smarcad1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.