Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Smad3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400069-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Smad3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Smad3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Smad3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SMAD3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Smad3 Anticorpo (38-Q): sc-101154
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Smad3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400069-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Smad3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400069-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SMAD3 codifica a Smad3, um transdutor de sinal e regulador transcricional que medeia a sinalização canônica de TGF-β/Activina a jusante de quinases receptoras de serina/treonina. Após a fosforilação na porção C-terminal, a Smad3 forma complexos com a SMAD4 e transloca-se para o núcleo para regular genes que controlam a parada do ciclo celular, a remodelação da matriz extracelular, a diferenciação e a modulação imune. A atividade da Smad3 integra-se com as vias MAPK, PI3K/AKT e Wnt para moldar respostas transcricionais dependentes do contexto e a regulação por feedback. A sinalização desregulada de SMAD3 tem sido associada a fibrose, progressão do câncer e mecanismos de doenças inflamatórias, tornando-a um alvo frequente para dissecação de vias em modelos celulares humanos.
Smad3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SMAD3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SMAD3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SMAD3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SMAD3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.