SLPI Plasmide Double Nickase (h): sc-418559-NIC

L’inibitore secretorio delle peptidasi leucocitarie (SLPI) è un piccolo inibitore delle proteasi seriniche, secreto, che contribuisce a mantenere l’omeostasi delle barriere epiteliali e mucosali limitando l’attività dell’elastasi dei neutrofili, della catepsina G e di proteasi correlate. Oltre alla funzione antiproteasica, SLPI può modulare la segnalazione dell’immunità innata e l’espressione genica infiammatoria, influenzando processi come la riparazione delle ferite, la difesa antimicrobica e il reclutamento dei leucociti. Un’alterata espressione di SLPI è stata riportata in condizioni infiammatorie delle vie aeree e della cute, nell’infiammazione mucosale cronica e nel rimodellamento tissutale associato alle infezioni, rendendolo un utile nodo molecolare per studiare l’equilibrio tra proteasi e antiproteasi. SLPI è quindi rilevante per la ricerca sulla biologia epiteliale, sulla regolazione immunitaria e sui fattori microambientali che plasmano l’infiammazione associata alle malattie.

SLPI Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SLPI nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SLPI. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SLPI. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SLPI interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.