SLITRK5 Plasmide Double Nickase (h): sc-411868-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SLITRK5 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SLITRK5 Double Nickase Plasmid (h) e il SLITRK5 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SLITRK5. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SLITRK5 Plasmide Double Nickase (h) | sc-411868-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SLITRK5 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-411868-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLITRK5 codifica una proteina transmembrana neuronale della famiglia SLITRK, implicata nella crescita dei neuriti, nello sviluppo delle sinapsi e nell’organizzazione delle connessioni sinaptiche eccitatorie. Attraverso i suoi domini extracellulari a ripetizioni ricche in leucina (LRR), SLITRK5 partecipa a eventi di riconoscimento e segnalazione cellula–cellula che modellano la maturazione sinaptica e l’affinamento dei circuiti durante il neurosviluppo. Alterazioni dell’espressione o della funzione di SLITRK5 sono state associate a fenotipi neuropsichiatrici e neuroevolutivi, incluse caratteristiche legate al disturbo ossessivo–compulsivo e modifiche dei circuiti cortico-striatali. Di conseguenza, SLITRK5 è spesso studiato in relazione a vie che regolano la sinaptogenesi, il patterning dei neuriti e la connettività neuronale dipendente dall’attività.
SLITRK5 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SLITRK5 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SLITRK5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SLITRK5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SLITRK5 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.