SLC6A14 Plasmide Double Nickase (h): sc-408198-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SLC6A14 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SLC6A14 Double Nickase Plasmid (h) e il SLC6A14 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SLC6A14. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SLC6A14 Plasmide Double Nickase (h) | sc-408198-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SLC6A14 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-408198-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC6A14 (ATB0,+) codifica un trasportatore di membrana plasmatica Na+/Cl−-dipendente che media l’assorbimento ad ampio spettro di amminoacidi neutri e cationici, inclusi amminoacidi a catena ramificata ed essenziali. Regolando la disponibilità intracellulare di amminoacidi, SLC6A14 influenza le vie di nutrient-sensing e di segnalazione metabolica, come mTORC1, supporta la sintesi proteica e contribuisce all’equilibrio redox attraverso il flusso di amminoacidi. L’espressione e l’attività di SLC6A14 sono state associate a programmi di trasporto epiteliale e a una modificata acquisizione di nutrienti in diversi contesti patologici, rendendolo un bersaglio utile per lo studio della riprogrammazione metabolica e della biologia dei trasportatori. L’analisi funzionale di SLC6A14 fornisce inoltre indicazioni sui meccanismi di controllo della crescita dipendente dagli amminoacidi, sull’adattamento allo stress e sulla regolazione del trasporto di membrana nelle cellule umane.
SLC6A14 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SLC6A14 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SLC6A14. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SLC6A14. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SLC6A14 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.