SLC25A36 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412475

Descripción general

SLC25A36 codifica un transportador de solutos de la membrana interna mitocondrial que actúa como transportador de nucleótidos, favoreciendo el intercambio de nucleótidos pirimidínicos entre el citosol y la matriz mitocondrial. Al mantener la disponibilidad intramitocondrial de dNTP, SLC25A36 contribuye a la replicación y reparación del ADN mitocondrial, a la capacidad de fosforilación oxidativa y a una homeostasis mitocondrial más amplia. La alteración del transporte de nucleótidos puede vincular la disfunción mitocondrial con cambios en el metabolismo energético, el equilibrio redox y el estrés replicativo, procesos investigados con frecuencia en la neurodegeneración, la señalización inflamatoria y la biología tumoral. Como miembro de la familia de transportadores mitocondriales, SLC25A36 se estudia comúnmente en el contexto de la biogénesis de orgánulos, las respuestas al estrés y la adaptación metabólica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SLC25A36 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SLC25A36 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SLC25A36 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SLC25A36 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SLC25A36.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SLC25A36 para la investigación de la señalización de SLC25A36, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SLC25A36 críticos para la función de SLC25A36
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SLC25A36 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SLC25A36 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SLC25A36 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SLC25A36. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SLC25A36 (h) y el plásmido HDR SLC25A36 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SLC25A36 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SLC25A36 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.