SLC25A36 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-412475

Panoramica

SLC25A36 codifica un trasportatore di soluti della membrana interna mitocondriale che funziona da trasportatore di nucleotidi, supportando lo scambio di nucleotidi pirimidinici tra il citosol e la matrice mitocondriale. Mantenendo la disponibilità intramitocondriale di dNTP, SLC25A36 contribuisce alla replicazione e riparazione del DNA mitocondriale, alla capacità di fosforilazione ossidativa e, più in generale, all’omeostasi mitocondriale. L’alterazione del trasporto dei nucleotidi può collegare la disfunzione mitocondriale a cambiamenti nel metabolismo energetico, nell’equilibrio redox e nello stress replicativo, processi spesso studiati nella neurodegenerazione, nella segnalazione infiammatoria e nella biologia tumorale. In quanto membro della famiglia dei trasportatori mitocondriali, SLC25A36 è comunemente studiato nel contesto della biogenesi dell’organello, delle risposte allo stress e dell’adattamento metabolico.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SLC25A36 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SLC25A36 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SLC25A36 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SLC25A36 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SLC25A36.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SLC25A36 per lo studio della segnalazione di SLC25A36, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni SLC25A36 critici per la funzione di SLC25A36
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SLC25A36 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal SLC25A36 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal SLC25A36 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SLC25A36. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal SLC25A36 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR SLC25A36 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SLC25A36 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SLC25A36 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.