SLC17A9 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432833

Descripción general

Slc17a9 codifica SLC17A9, un transportador vesicular de nucleótidos (VNUT) que carga ATP y otros nucleótidos en vesículas secretoras, lo que permite una señalización purinérgica regulada. Al controlar el contenido de ATP en las vesículas, SLC17A9 influye en la comunicación dependiente de la exocitosis que activa las vías de los receptores P2X/P2Y y respuestas posteriores vinculadas a Ca²⁺ y MAPK en contextos neuronales e inmunitarios. Esta actividad de transporte sustenta procesos como la neurotransmisión, la activación microglial y la liberación de mediadores inflamatorios, lo que convierte a Slc17a9 en un nodo útil para estudiar el diálogo neuroinmunitario y la inflamación estéril. La alteración de la gestión vesicular del ATP y del tono purinérgico se ha implicado en la señalización del dolor, la neuroinflamación y las respuestas a lesiones tisulares, situando a Slc17a9 como una diana mecánicamente relevante para el análisis de vías en modelos murinos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SLC17A9 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Slc17a9 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Slc17a9 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Slc17a9 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SLC17A9.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Slc17a9 para la investigación de la señalización de SLC17A9, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Slc17a9 críticos para la función de SLC17A9
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Slc17a9 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SLC17A9 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SLC17A9 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Slc17a9. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SLC17A9 (m) y el plásmido HDR SLC17A9 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Slc17a9 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Slc17a9 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.