SIRT2 Plasmide Double Nickase (h): sc-400590-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SIRT2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SIRT2 Double Nickase Plasmid (h) e il SIRT2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SIRT2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SIRT2 Antibody (A-5): sc-28298
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SIRT2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400590-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SIRT2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400590-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SIRT2 codifica una deacetilasi NAD⁺-dipendente che si localizza principalmente nel citoplasma e modula gli stati di acetilazione delle proteine che regolano la dinamica dei microtubuli, la progressione del ciclo cellulare e le risposte allo stress cellulare. Deacetilando substrati come l’α-tubulina e regolatori del metabolismo, SIRT2 contribuisce a coordinare il rimodellamento del citoscheletro, la fedeltà mitotica e l’adattamento metabolico, collegando la sua attività a vie influenzate dalla disponibilità di NAD⁺ e dall’equilibrio redox. Alterazioni della funzione di SIRT2 sono state studiate nel contesto di neurodegenerazione, infiammazione e fenotipi correlati al cancro, in cui cambiamenti nella segnalazione dipendente dall’acetilazione possono influire su differenziamento, sopravvivenza e stabilità genomica. In quanto membro della famiglia delle sirtuine, SIRT2 è spesso oggetto di studio per il suo ruolo nell’integrare il sensing dei nutrienti con il controllo epigenetico e post-traduzionale dei programmi cellulari.
SIRT2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SIRT2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SIRT2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SIRT2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SIRT2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.