Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SH-PTP2 Plasmide Double Nickase (h): sc-400260-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SH-PTP2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SH-PTP2 Double Nickase Plasmid (h) e il SH-PTP2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira PTPN11. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SH-PTP2 Antibody (B-1): sc-7384
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SH-PTP2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400260-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SH-PTP2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400260-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PTPN11 codifica SH-PTP2 (SHP2), una fosfatasi tirosinica proteica citosolica che trasmette i segnali dalle tirosin-chinasi recettoriali attivate e dai recettori delle citochine alle vie a valle RAS–MAPK/ERK e PI3K–AKT. Attraverso i suoi domini SH2 e il dominio PTP catalitico, SHP2 modula interazioni proteina‑proteina dipendenti dalla fosforilazione che controllano proliferazione, differenziamento, migrazione e sopravvivenza. La funzione di PTPN11 è inoltre collegata alla dinamica della segnalazione JAK/STAT e alla regolazione tramite feedback all'interno delle reti di segnalazione dei fattori di crescita. Un'attività di PTPN11 deregolata o mutazioni sono state associate a sindromi dello sviluppo e a diversi contesti di segnalazione oncogenica, rendendolo un nodo ampiamente studiato nel rimodellamento delle vie di segnalazione e nella ricerca sulla trasduzione del segnale.
SH-PTP2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PTPN11 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PTPN11. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PTPN11. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PTPN11 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.