SerpinB1a Plasmide Double Nickase (m): sc-425896-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SerpinB1a Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SerpinB1a Double Nickase Plasmid (m) e il SerpinB1a Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Serpinb1a. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SerpinB1a Plasmide Double Nickase (m) | sc-425896-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SerpinB1a Plasmide Double Nickase (m2) | sc-425896-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Serpinb1a codifica l’inibitore delle serin-proteasi SerpinB1a, una serpin intracellulare del clade B che frena le proteasi di derivazione neutrofila come l’elastasi, la catepsina G e la proteinasi 3, limitando il danno proteolitico durante l’infiammazione. Modulando il rimodellamento della matrice extracellulare guidato dalle proteasi e regolando la sopravvivenza dei leucociti, SerpinB1a influenza la segnalazione dell’immunità innata, le risposte allo stress e l’omeostasi tissutale. Alterazioni dell’attività di SerpinB1a sono state associate a fenotipi infiammatori disregolati, a una maggiore suscettibilità a danno tissutale legato alle infezioni e a una risoluzione compromessa delle risposte immunitarie. Nei modelli murini, Serpinb1a viene quindi studiato in vie che collegano la funzione dei granulociti, la proteostasi infiammatoria e il danno d’organo in seguito a infiammazione acuta o cronica.
SerpinB1a Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Serpinb1a nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Serpinb1a. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Serpinb1a. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Serpinb1a interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.