SEMA6C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422889
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SEMA6C O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SEMA6C, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SEMA6C Anticorpo (Ex-14): sc-74277
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SEMA6C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422889 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Sema6c codifica a semaforina de classe 6 SEMA6C, um sinal de orientação transmembranar que regula a sinalização dependente de contato durante a padronização tecidual. Por meio de interações com receptores plexina e da sinalização associada de GTPases da família Rho, a SEMA6C influencia a remodelação do citoesqueleto, a polaridade celular, a migração e o crescimento de neuritos. As vias semaforina–plexina também estão implicadas na formação de tratos axonais e na conectividade sináptica, e alterações na sinalização de semaforinas têm sido associadas a fenótipos de neurodesenvolvimento e neurodegeneração em sistemas modelo. Além disso, membros da família SEMA6 podem modular o comportamento de células vasculares e imunes, o que sustenta a investigação da comunicação célula–célula em contextos de desenvolvimento e de inflamação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SEMA6C (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sema6c em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sema6c, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sema6c na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SEMA6C.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sema6c para a investigação da sinalização de SEMA6C, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sema6c críticos para a função SEMA6C
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sema6c para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SEMA6C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SEMA6C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sema6c. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SEMA6C Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SEMA6C (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sema6c para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sema6c definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.