Selenoprotein W Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405939

Descripción general

SELENOW codifica la selenoproteína W, una pequeña proteína que contiene selenio y está enriquecida en músculo y cerebro, y que contribuye a la homeostasis redox celular mediante actividad antioxidante dependiente del selenol. Se la ha implicado en la regulación del equilibrio de especies reactivas de oxígeno, el mantenimiento del estado de los tioles proteicos y el soporte de la integridad del citoesqueleto y de la adaptación al estrés en condiciones oxidativas e inflamatorias. Los procesos asociados a SELENOW se entrecruzan con redes redox dependientes del glutatión y con una biología más amplia del selenio que influye en la función mitocondrial y en programas de supervivencia celular. Se han descrito alteraciones en la expresión de SELENOW en contextos de estrés oxidativo, vías asociadas a la neurodegeneración y estados metabólicos e inflamatorios, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de señalización redox y susceptibilidad al estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Selenoprotein W (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SELENOW en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SELENOW junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SELENOW tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Selenoprotein W.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SELENOW para la investigación de la señalización de Selenoprotein W, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SELENOW críticos para la función de Selenoprotein W
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SELENOW para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Selenoprotein W CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Selenoprotein W CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SELENOW. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Selenoprotein W (h) y el plásmido HDR Selenoprotein W (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SELENOW para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SELENOW definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.