Plásmido Doble Nickase (m) selenocysteine lyase: sc-424520-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)selenocysteine lyase consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa selenocysteine lyase (m) y el plásmido de doble nickasa selenocysteine lyase (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Scly. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) selenocysteine lyase | sc-424520-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen **Scly** de ratón codifica la **liasa de selenocisteína**, una enzima dependiente de **fosfato de piridoxal** que descompone la selenocisteína en alanina y, al mismo tiempo, libera selenio para su reutilización. Esta actividad contribuye a la **homeostasis del selenio** e interactúa con el metabolismo de las **selenoproteínas** al influir en el reservorio de selenio biodisponible necesario para las vías antioxidantes y de regulación redox. A través de sus efectos sobre el equilibrio redox celular, la función de Scly es relevante para estudios de respuestas al **estrés oxidativo** y de regulación metabólica en tejidos sensibles al selenio. Las alteraciones en el manejo del selenio se han asociado con fenotipos que afectan el metabolismo energético y la resiliencia al estrés, lo que convierte a Scly en un objetivo útil para modelos mecanísticos de la biología del selenio.
selenocysteine lyase El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Scly en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Scly. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Scly. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Scly alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.