Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SDHC Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405559
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SDHC Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico SDHC, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SDHC Antibody (C-2): sc-515102
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SDHC Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-405559 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
SDHC codifica la subunità C del complesso succinato deidrogenasi, un componente integrale di membrana del Complesso II mitocondriale che ancora l’enzima alla membrana mitocondriale interna e supporta il trasferimento di elettroni dal succinato all’ubichinone. Grazie al suo ruolo al crocevia tra il ciclo dell’acido tricarbossilico (TCA) e la fosforilazione ossidativa, SDHC contribuisce alla funzione della catena respiratoria, all’equilibrio redox mitocondriale e al metabolismo energetico cellulare. L’alterazione dell’integrità del complesso SDH può modificare la gestione del succinato e le vie di segnalazione a valle collegate alla riprogrammazione metabolica e alle risposte allo stress. La disfunzione di SDHC è stata associata a meccanismi di malattie mitocondriali e alla biologia della predisposizione tumorale, rendendola rilevante per lo studio di fenotipi guidati dal metabolismo e del controllo di qualità mitocondriale.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SDHC (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SDHC in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SDHC insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SDHC a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SDHC.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SDHC per lo studio della segnalazione di SDHC, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni SDHC critici per la funzione di SDHC
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SDHC per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal SDHC CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal SDHC CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SDHC. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal SDHC Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR SDHC (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SDHC per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SDHC definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.