Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SDHB Plasmide Double Nickase (h): sc-401529-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SDHB Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SDHB Double Nickase Plasmid (h) e il SDHB Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SDHB. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SDHB Antibody (G-10): sc-271548
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SDHB Plasmide Double Nickase (h) | sc-401529-NIC | 20 µg | $410.00 |
SDHB codifica la subunità ferro-zolfo della succinato deidrogenasi (complesso mitocondriale II), che accoppia l’ossidazione del succinato nel ciclo degli acidi tricarbossilici al trasferimento di elettroni all’ubichinone nella catena respiratoria. Attraverso questo duplice ruolo, SDHB contribuisce a regolare il metabolismo energetico mitocondriale, l’omeostasi redox e il flusso attraverso vie anaplerotiche e biosintetiche. L’alterazione di SDHB può favorire l’accumulo di succinato e cambiamenti di segnalazione a valle che influenzano le vie del fattore inducibile dall’ipossia (HIF) e la regolazione epigenetica tramite diossigenasi dipendenti da α-chetoglutarato. Alterazioni genetiche e funzionali di SDHB sono associate a disfunzione mitocondriale e sono ampiamente studiate nel contesto della riprogrammazione metabolica e delle sindromi di predisposizione tumorale.
SDHB Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SDHB nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SDHB. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SDHB. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SDHB interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.