S-100A5 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-418401-LAC

O gene humano S100A5 codifica a S-100A5, uma proteína EF-hand ligante de Ca2+ da família S100 que atua como sensor de cálcio para modular interações proteína–proteína e a sinalização dependente do estado celular. A S-100A5 está associada a processos regulados por cálcio, incluindo organização do citoesqueleto, dinâmica de membranas e respostas transcricionais, em linha com o envolvimento mais amplo das proteínas S100 na biologia neuronal e epitelial. Padrões alterados de expressão da família S100 têm sido associados à sinalização relacionada à inflamação e a vias relevantes para o câncer, como MAPK e NF-κB, tornando a S100A5 um marcador útil e um nó mecanístico para estudos de respostas celulares ao estresse e programas de diferenciação. Sua expressão dependente do contexto sustenta aplicações na investigação de especificação de linhagem, integração de sinais e reprogramação de vias em modelos relevantes de doença.

As Partículas de Ativação Lentivirais S-100A5 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de S100A5 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais S-100A5 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição S100A5, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de S-100A5. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo S100A5 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.