Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
S-100A16 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-426783
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- S-100A16 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico S-100A16, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: S-100A16 Antibody (G-7): sc-390151
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
S-100A16 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-426783 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Il gene murino S100a16 codifica S-100A16, una piccola proteina legante il calcio con motivo EF-hand appartenente alla famiglia S100, che modula la segnalazione calcio-dipendente e le interazioni proteina–proteina. S-100A16 è associata alla regolazione dell’organizzazione del citoscheletro, della motilità cellulare e delle risposte allo stress cellulare, con ruoli riportati nei programmi di differenziazione e nel rimodellamento della rete di actina. Attraverso interazioni con nodi di segnalazione che influenzano processi associati a MAPK e alle GTPasi Rho, S-100A16 può incidere sulla dinamica dell’adesione e sugli output trascrizionali. Un’espressione deregolata di S100A16 è stata associata al rimodellamento patologico dei tessuti e a fenotipi oncogeni in molteplici contesti, rendendolo un bersaglio utile per studi meccanicistici su proliferazione, migrazione e vie associate all’infiammazione.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO S-100A16 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene S100a16 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del S100a16 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto S100a16 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina S-100A16.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di S100a16 per lo studio della segnalazione di S-100A16, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni S100a16 critici per la funzione di S-100A16
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di S100a16 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal S-100A16 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal S-100A16 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus S100a16. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal S-100A16 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR S-100A16 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia S100a16 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio S100a16 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.