RSU1 Plasmide Double Nickase (h): sc-405511-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RSU1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RSU1 Double Nickase Plasmid (h) e il RSU1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RSU1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: RSU1 Antibody (1C6): sc-517140
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RSU1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405511-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RSU1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405511-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RSU1 (Ras Suppressor 1) è una proteina adattatrice associata alle adesioni focali che si lega ai complessi PINCH/ILK e contribuisce ad accoppiare la segnalazione mediata dalle integrine all’organizzazione del citoscheletro. Attraverso la regolazione dell’adesione cellulare, dello spreading e della migrazione, RSU1 influenza la dinamica dell’actina e nodi di segnalazione a valle spesso collegati agli output delle vie MAPK e PI3K/AKT. L’alterazione della segnalazione di adesione mediata da RSU1 è stata associata a cambiamenti nella motilità cellulare e nei programmi di sopravvivenza rilevanti per la progressione tumorale e i fenotipi di invasione. RSU1 è quindi ampiamente studiata in contesti quali il sensing della matrice extracellulare, la meccanotrasduzione e il controllo, dipendente dall’adesione, della proliferazione e dell’apoptosi.
RSU1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RSU1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RSU1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RSU1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RSU1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.