RMND5A Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-413041

Panoramica

RMND5A (Required for Meiotic Nuclear Division 5 Homolog A) codifica una proteina conservata implicata nel controllo di qualità delle proteine dipendente dall’ubiquitina, con ruoli riportati in processi associati alle ligasi E3 dell’ubiquitina che influenzano la proteostasi e la progressione del ciclo cellulare. Attraverso connessioni con l’ubiquitinazione e il turnover di proteine regolatorie, RMND5A viene studiato nel contesto delle risposte allo stress, del controllo della proliferazione e del mantenimento dell’omeostasi cellulare. L’alterazione dei componenti della via dell’ubiquitina è frequentemente collegata a instabilità genomica e a segnali di crescita modificati, rendendo RMND5A un bersaglio utile per studi meccanicistici sulla proteostasi deregolata nella biologia delle malattie umane.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO RMND5A (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene RMND5A in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del RMND5A insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto RMND5A a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina RMND5A.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di RMND5A per lo studio della segnalazione di RMND5A, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni RMND5A critici per la funzione di RMND5A
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di RMND5A per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal RMND5A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal RMND5A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus RMND5A. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal RMND5A Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR RMND5A (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia RMND5A per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio RMND5A definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.