RHBDL6 Plasmide Double Nickase (h): sc-404212-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RHBDL6 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RHBDL6 Double Nickase Plasmid (h) e il RHBDL6 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RHBDF2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RHBDL6 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404212-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RHBDL6 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404212-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RHBDF2 codifica un membro inattivo della famiglia delle romboidi (iRhom2) che regola il traffico e la maturazione di ADAM17/TACE, controllando così lo shedding dell’ectodominio di numerose proteine di membrana, incluse TNF e i ligandi di EGFR. Attraverso questo ruolo, RHBDF2 influenza la segnalazione infiammatoria, l’attivazione della via di EGFR e la proteostasi responsiva allo stress in contesti epiteliali e immunitari. Alterazioni dell’attività di RHBDF2 sono state collegate a una deregolazione della segnalazione di citochine e fattori di crescita e sono associate a fenotipi iperproliferativi e infiammatori, rendendolo rilevante per studi meccanicistici sulla biologia cutanea, l’immunità innata e le decisioni di destino cellulare dipendenti dai segnali. RHBDL6 è comunemente usato come alias nella denominazione di alcuni reagenti, ma il locus bersaglio qui è il gene umano RHBDF2 per studi di genomica funzionale incentrati sulle vie di segnalazione.
RHBDL6 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RHBDF2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RHBDF2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RHBDF2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RHBDF2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.