Plásmido Doble Nickase (h) RHBDL6: sc-404212-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)RHBDL6 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa RHBDL6 (h) y el plásmido de doble nickasa RHBDL6 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RHBDF2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) RHBDL6 | sc-404212-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) RHBDL6 | sc-404212-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RHBDF2 codifica un miembro inactivo de la familia de las romboidas (iRhom2) que regula el tráfico y la maduración de ADAM17/TACE, controlando así el desprendimiento del ectodominio (“shedding”) de múltiples proteínas de membrana, incluidas TNF y los ligandos de EGFR. A través de esta función, RHBDF2 influye en la señalización inflamatoria, la activación de la vía de EGFR y la proteostasis sensible al estrés en contextos epiteliales e inmunitarios. La actividad alterada de RHBDF2 se ha vinculado con una desregulación de la señalización de citocinas y factores de crecimiento, y se asocia con fenotipos hiperproliferativos e inflamatorios, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de la biología de la piel, la inmunidad innata y las decisiones de destino celular dependientes de señales. RHBDL6 se utiliza comúnmente como un alias en la denominación de reactivos, pero el locus diana aquí es el gen humano RHBDF2 para una genómica funcional centrada en vías.
RHBDL6 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RHBDF2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RHBDF2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RHBDF2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RHBDF2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.